Gadolínium tartalmú kontrasztanyagok toxicitásának vizsgálata sejttenyészeteken
Cikk címe: Gadolínium tartalmú kontrasztanyagok toxicitásának vizsgálata sejttenyészeteken
Szerzők: Laczovics Attila, Szemán-Nagy Gábor, Tóth Melinda, Dr. Berényi Ervin
Intézmények: Debreceni Egyetem Orvosi Laboratóriumi és Képalkotó Diagnosztikai Tanszék, Debreceni Egyetem Természettudományi és Technológiai Kar Biotechnológiai és Mikrobiológiai Tanszék
Évfolyam: XIV. évfolyam
Lapszám: 2015. / 08. lapszám
Oldal: 58-61
Rovat: KÉPALKOTÓ DIAGNOSZTIKA
Alrovat: KUTATÁS - FEJLESZTÉS
Absztrakt:
A gadolínium tartalmú kontrasztanyagok használata beépült az MRI vizsgálatok protokolljába. Munkánk során azt tűztük ki célul, hogy kifejlesztünk egy olyan módszert, melynek segítségével megítélhető klinikai forgalomban lévő ágensek toxicitása. Vizsgálatainkat kétféle sejtvonalon végeztük, három különböző szerkezettel rendelkező gadolínium tartalmú kontrasztanyag bevonásával. A172-es glioblastoma sejtvonalat és fibroblast sejteket 96 lyukú plateben szélesztettük. A kitapadást követően lecseréltük a tápfolyadékot, a sejtekre rákerültek az ágensek 1 μmol/ml végkoncentrációban. A kelátok jelenlétében 24, illetve 48 óráig inkubáltuk tovább a sejteket 37°C-on, 5%-os CO 2 jelenléte mellett. Ezt követően a médiumot lecseréltük MTT-re [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromid]. A keletkezett kristályokat DMSO-ban oldottuk fel. A kapott oldat színintenzitása arányos a sejtek életképességével. Az MTT assay alkalmas az ágensek jelenlétében szélesztett sejtek életképességének és proliferációjának a vizsgálatára. A módszer rávilágít a kontrasztanyagok kémiai szerkezetének fontosságára, mely befolyásolja a gadolínium dúsulásának a mértékét.
Abstract:
The use of gadolinium containing contrast agents has been incorporated into the examination protocol of MRI studies. We set out to design a method with which we can determine the toxicity of commercially available gadolinium containing contrast agents. For our study we used two different cell lines, and four different gadolinium containing contrast agents. A-172 glioblastoma cell lines from astrocytes and fibroblast cells were grown in a 96 hole plate. Four hours later we exchanged the medium, then we added the contrast agents in 1μmol/ml of concentration. Cells were incubated in the presence of chelates for 24–, 48 hours at 37 degrees Celcius, and in the presence of 5% of CO 2 . Then we exchanged the medium for 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT). The colour intensity of the thus acquired solution is proportional to the viability of the cell. The MTT assay is suitable for the examination of the viability and proliferation of cells grown in the presence of contrast agents. Our method highlights the importance of the chemical structure of contrast agents which influences the uptake of gadolinium due to the different dissociative kinetics of the different complexes.
XIV. évfolyam
2015. / 08. lapszám / Október
| Szerző | Intézmény |
|---|---|
| Laczovics Attila | Debreceni Egyetem Orvosi Laboratóriumi és Képalkotó Diagnosztikai Tanszék |
| Szemán-Nagy Gábor | Debreceni Egyetem Természettudományi és Technológiai Kar Biotechnológiai és Mikrobiológiai Tanszék |
| Tóth Melinda | Debreceni Egyetem Természettudományi és Technológiai Kar Biotechnológiai és Mikrobiológiai Tanszék |
| Dr. Berényi Ervin | Debreceni Egyetem Természettudományi és Technológiai Kar Biotechnológiai és Mikrobiológiai Tanszék |
[1] Nelson, KL: Runge, Val M. M.D.: Basic Principles of MR Contrast, Topics in Magnetic Resonance Imaging, Volume 7, Issue 3 (1995)
[2] Niendorf HP, Haustein J, Cornelius I, Alhassan A, Clauß W: Safety of gadolinium-DTPA: Extended clinical experience, Magnetic Resonance in Medicine, Volume 22, Issue 2, pages 222–228 (1991)
[3] Larson KN, Gagnon AL, Darling MD, Patterson JW, Cropley TG: Nephrogenic Systemic Fibrosis Mani festing a Decade After Exposure to Gadolinium, JAMA Dermatol. Published online May 27, 2015. doi: 10. 1001/jamadermatol.2015.0976
[4] Mendichovszky IA, Marks SD, Simcock CM, Olsen OE: Gadolinium and nephrogenic systemic fibrosis: time to tighten practice, Pediatric Radiology, Volume 38, Issue 5, pp 489-496 (2008)
[5] Boyd AS, Zic JA, Abraham JL: Gadolinium deposition in nephrogenic fibrosing dermopathy, J Am Acad Dermatol. 2007 Jan;56(1):27-30. Epub 2006 Nov 15.
[6] High WA, Ayers RA, Chandler J, Zito G, Cowper SE: Gadolinium is detectable within the tissue of patients with nephrogenic systemic fibrosis, J Am Acad Dermatol, 2007 Jan;56(1):21-6. Epub 2006 Nov 9.
[7] Thomsen HS, Morcos SK, Dawson P: Is there a causal relation between the administration of gadolinium based contrast media and the development of nephrogenic systemic fibrosis (NSF)?, Clin Radiol, 2006 Nov;61(11):905-6.
[8] Baranyai Zs, Pálinkás Z, Uggeri F, Maiocchi A, Aime S, Brücher E: Dissociation Kinetics of Open-Chain and Macrocyclic Gadolinium(III) – Aminopolycarboxylate Complexes Related to Magnetic Resonance Imaging: Catalytic Effect of Endogenous Ligands, Chemistry – A European Journal, Volume 18, Issue 51, pages 16426–16435 (2012)
[9] Radbruch A, Weberling LD, Kieslich PJ, Eidel O, Burth S, Kickingereder P, Heiland S, Wick W, Schlemmer HP, Bendszus M: Gadolinium retention in the dentate nucleus and globus pallidus is dependent on the class of contrast agent, Radiology, 2015 Jun;275(3):783-91. doi: 10.1148/radiol.2015150337. Epub 2015 Apr 6.
[10] Kanda T, Fukusato T, Matsuda M, Toyoda K, Oba H, Kotoku J, Haruyama T, Kitajima K, Furui S: Gadolinium- based Contrast Agent Accumulates in the Brain Even in Subjects without Severe Renal Dysfunction: Evaluation of Autopsy Brain Specimens with Inductively Coupled Plasma Mass Spectroscopy, Radiology, 2015 May 5:142690.
[11] Kanal E, Tweedle MF: Residual or retained gadolinium: practical implications for radiologists and our patients, Radiology. 2015 Jun;275(3):630-4. doi: 10.1148/radiol.2015150805. Epub 2015 May 5.
[12] McDonald RJ, McDonald JS, Kallmes DF, Jentoft ME, Murray DL, Thielen KR, Williamson EE, Eckel LJ: Intracranial Gadolinium Deposition after Contrastenhanced MR Imaging, Radiology, 2015 Jun;275(3): 772-82. doi: 10.1148/radiol.15150025. Epub 2015 Mar 5.
[13] Kanda T, Osawa M, Oba H, Toyoda K, Kotoku J, Haruyama T, Takeshita K, Furui S: High Signal Intensity in Dentate Nucleus on Unenhanced T1-weighted MR Images: Association with Linear versus Macrocyclic Gadolinium Chelate Administration, Radiology, 2015 Jun;275(3):803-9. doi: 10.1148/radiol.14140364. Epub 2015 Jan 27.